Введение
Глава I. Обзор литературы
1.1. Развитие концепции генной терапии 18
1.2. Пути реализации генной терапии 21
1.3. Генно-терапевтические подходы к лечению злокачественных новообразований .
1.4. Подходы к генной терапии для коррекции токсических реакций, вызванных консервативными методами лечения
Глава II. Материалы и методы исследований
11.1. Материалы исследования 83
11.2. Объекты исследования 86
11.3. Аналитические и иммунохимические методы анализа 88
11.4. Клинико-лабораторные исследования 94
11.5. Методы экспериментальных исследований в системе in vitro 95
11.6. Методы экспериментальных исследований в системе in vivo 97
Результаты собственных исследований
Глава III. Доклиническое изучение лекарственного средства на основе генно-терапевтической конструкции, содержащей гены тимидинкиназы вируса простого герпеса HSVtk и гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора GM-CSF, в невирусной системе доставки
111.1. Оценка продукции целевых белков - HSVtk и h(m)GM-CSF в 107 клетках, трансфицированных HSVtk-h(m)GM-CSF-РРТ
111.2. Оценка биологической активности фермента HSVtk и цитокина GM-CSF в системе in vitro
111.3. Изучение фармакокинетики модельного лекарственного средства на основе HSVtk-mGM-CSF-РРТ в организме животных по продукции фермента HSVtk
111.4. Изучение специфической (противоопухолевой) активности 123 лекарственных средств на основе HSVtk-m(h)GM-CSF-РРТ в системе in vivo
111.4.1. Разработка эффективного режима применения модельного лекарственного средства на основе HSVtk-mGM-CSF-РРТ в сочетании с пролекарством GCV на модели перевиваемой опухоли у животных – саркомы S37
111.4.2. Исследование вклада гена mGM-CSF в составе модельного лекарственного средства на основе HSVtk-mGM-CSF-РРТ в реализацию противоопухолевого действия in vivo
111.4.3. Определение спектра противоопухолевой активности фармакологического и модельного лекарственных средств на моделях перевиваемых опухолей мышей и человека, чувствительных к противоопухолевой генной терапии III.
4.3.1 Оценка противоопухолевой активности модельного лекарственного средства на основе HSVtk-mGM-CSF-PPT при GCV на моделях иммунокомпетентных эффективности средства на основе пролекарства системном введении пролекарства перевиваемых опухолей мышей уживотных
III.4.3.2. Оценка противоопухолевой фармакологического лекарственного средства на основе HSVtk-hGM-CSF-PPT при системном введении GCV на ксенографтах опухолей человека
111.4.1. Оценка противоопухолевой эффективности комбинированной генной и химиотерапии у экспериментальных животных
111.4.2. Оценка противоопухолевой эффективности комбинированной генной и лучевой терапии у экспериментальных животных
III.5. Общетоксическое действие фармакологического лекарственного средства на основе генно-терапевтической конструкции HSVtk-hGM-CSF-РРТ
111.5.1. Определение потенциального токсического действия 166 фармакологического лекарственного средства на основе HSVtk-hGM-CSF-РРТ при его однократном подкожном введении мышам и крысам («острая» токсичность)
111.5.2. Определение потенциального токсического действия фармакологического лекарственного средства на основе HSVtk-hGM-CSF-РРТ в сочетании с пролекарством GCV в составе препарата Цимевен при их однократном введении крысам («острая» токсичность)
111.5.3. Определение потенциального токсического действия фармакологического лекарственного средства а на основе HSVtk-hGM-CSF-РРТ при его многократном подкожном введении крысам («хроническая» токсичность)
111.6.1. Оценка морфологических изменений в культивируемых клетках мыши и человека, трансфицированных HSVtk-m(h)GM-CSF-РРТ, после воздействия GCV
111.6.2. Оценка морфологических изменений в тканях подкожных имплантатов саркомы мыши S37 после лечения HSVtk-mGM-CSF-РРТ в сочетании с GCV
Обсуждение результатов 184
Глава IV. Изучение генно-терапевтического лекарственного средства на основе рекомбинантного аденовируса 5 серотипа, обеспечивающего продукцию рекомбинантного лактоферрина человека
IV.1. Характеристика генно-терапевтического лекарственного средства Ad5-hLf как продуцента целевого белка in vitro
IV.2. Оценка биологической активности рекомбинантного rhLf в системах in vitro и ex vivo
IV.3. Изучение фармакокинетики генно-терапевтического лекарственного средства Ad5-hLf по продукции целевого белка в организме животных
IV.4. Изучение специфической активности (детоксицирующего действия) генно-терапевтического лекарственного средства Ad5-hLf в системе in vivo
IV.4.1 Оценка детоксицирующего действия конструкции на основе 213
Ad5-hLf на модели токсикоза у животных, индуцированного четыреххлористым углеродом (CCL4)
IV.4.2. Оценка детоксицирующего действия Ad5-hLf на модели токсикоза у животных, индуцированного цитостатиком
IV.4.3. Изучение влияния Ad5-hLf на животных с эндотоксикозом, вызванным ростом экспериментальных опухолей
IV.5. Общетоксическое действие препарата АдеЛакт на основе генно-терапевтического лекарственного средства Ad5-hLf
IV.5.1. Определение потенциального токсического действия препарата АдеЛакт при его однократном внутривенном введении мышам и крысам («острая» токсичность)
IV.5.2. Определение потенциального токсического действия препарата АдеЛакт при его многократном внутривенном введении крысам и кроликам («хроническая» токсичность) Обсуждение результатов 232
Глава V. Методология изучения препаратов для генной терапии 240
V.1. Характеристика препаратов для генной терапии как продуцентов биологически активных рекомбинантных белков
V.2. Изучение фармакокинетики препаратов для генной терапии 244
V.3. Изучение фармакологической активности (фармакодинамики) препаратов для генной терапии
V.4. Токсикологические исследования препаратов для генной 254
терапии
Выводы 258
Практические рекомендации 261
Список использованной литературы
