Введение
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7
1.1. PoflRubus, подрод Idaeobatus 7
1.1.2. Биологические особенности малины 8
1.1.3. Генетические аспекты ремонтантности 9
1.2. Современные методы исследования генома растений 11
1.2.1. Морфо-фенотипические и биохимические методы 11
1.2.2. Молекулярно- генетические методы исследования генома растений 12
1.2.2.1. Подход основанный на полиморфизме длин рестрикционных фрагментов 13
1.2.2.2. Использование метода ГЩР для молекулярно- генетического исследования генома растений 14
1.2.2.3. RAPD-анализ 19
1.3. Микросателлиты и их типы 21
1.3,1. Методы исследования генома с помощью микросателлитньгх последовательностей , 24
1.4. Использование молекулярных маркеров в изучении генома и селекции малины 28
1.4.1. Биохимические маркеры 29
1.4.2. Изоферментные маркеры 30
1.4.3. RKLP-маркеры 31
1.4.4. RAPD- маркеры 35
1.4.5. SCAR-маркеры 37
1.4.6. ДНК секвенирование 38
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 40
2.1. Объекты исследований 40
2.2. Методы исследования 41
2.2.1. Выделение геномной ДНК 41
2.2.2. ISSR-PCR 44
2.2.3. RAPD-PCR 45
2.2.4. M13-PCR 46
2.2.5. Создание филогенетического дерева на основе ISSR-маркеров 47
2.2.6. Приготовление компетентных клеток 47
2.2.7. Цитирование 48
2.2.8. Трансформация 48
2.2.9. Выделение ДНК из агарозных гелей 49
2.3. Материалы и оборудование 50
2.3.1. Оборудование 50
2.3.2. Реактивы^ среды и ферменты 50
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЙ 53
3.1. Выделение ДНК малины 53
3.2. Выбор метода для молекулярно-генетического анализа малины 59
3.3. Полиморфизм межмикросателлитных последовательностей ДНК на межвидовом уровне 62
3.4. Использоание ISSR-маркеров для изучения филогенетических связей сортов и видов ремонтантной малины 67
3.5. Использование ISSR-маркеров для молекулярно-генетической идентификация и паспортизация сортов малины 77
3.6. Молекулярное маркирование признака ремонтантності* у малины с использованием IS SR-PCR 81
ВЫВОДЫ 84
БЛАГОДАРНОСТИ 86
ЛИТЕРАТУРА 87
