Введение
1. Обзор литературы
1.1. Метаболическая депрессия в природе 13
1.2. Жизненный цикл миноги и лягушки 14
1.3. Структура внутриклеточного стандартного метаболизма 20
1.4. Регуляция энергетического метаболизма. Роль митохондрий в метаболической депрессии
1.4.1. Система окислительного фосфорилирования. Метаболические состояния митохондрий по Чансу 22
1.4.2. Регуляция энергетического метаболизма в период метаболической депрессии 25
1.5. «Утечка» протонов, или разобщение окислительного фосфорилирования 30
1.5.1. Разобщители окислительного фосфорилирования
1.5.1.1. Искусственные разобщители 31
1.5.1.2. Природные разобщители 32
1.5.2. Механизм действия разобщителей: роль мембранных белков митохондрий 33
1.5.2.1. Белки внутренней мембраны митохондрий, принимающие участие в разобщении окислительного фосфорилирования 33
1.5.2.2. Гипотеза «мягкого разобщения». Механизм функционирования разобщающих белков 36
1.5.3. Универсальность свободного окисления и его регуляция в период метаболической депрессии 38
1.6. Неспецифическая проницаемость митохондрий. Физиологическое значение и регуляция 40
1.6.1. Две конформации неспецифической поры: низкопроводящая и высокопроводящая. Роль поры в Са -сигнализации и клеточной гибели 41
1.6.2. Некоторые аспекты регуляции функционирования поры 43
1.6.3. Структура поры 45
2. Материал и методы исследования
2.1. Экспериментальные животные 50
2.2. Измерение концентрации глюкозы в плазме крови 50
2.3. Исследование жирнокислотного состава плазмы крови 51
2.4. Определение свободных аминокислот в плазме крови 53
2.5. Выявление гликогена и липидов на срезах печени 55
2.6. Выделение митохондрий 56
2.7. Измерение скоростей дыхания митохондрий 57
2.8. Исследование набухания митохондрий 58
2.9. Определение содержания адениновых нуклеотидов в экстрактах митохондрий и печени 59
3. Результаты исследования
3.1. Энергетические субстраты в плазме крови миног и лягушек в периоды метаболической депрессии и активности 61
3.1.1. Содержание глюкозы 61
3.1.2. Содержание отдельных классов липидов и индивидуальных жирных кислот 63
3.1.3. Свободные аминокислоты 69
3.2. Биоэнергетические параметры митохондрий печени миног и лягушек в периоды метаболической депрессии и активности
3.2.1. Оценка параметров дыхания 74
3.2.2. Содержание адениновых нуклеотидов в митохондриях и ткани печени 85
3.3. Ресопрягающие эффекты карбоксиатрактилата и глутамата на разобщающее действие лаурата 89
3.4. Мембранная проницаемость митохондрий печени миног и лягушек. Индукция поры и действие эффекторов поры на набухание митохондрий в разных средах инкубации. Сравнение с млекопитащими
3.4.1. Проницаемость мембран деэнергизованных и энергизованных митохондрий в растворе нитрата аммония 96
3.4.2. Эффекты ингибиторов поры на набухание митохондрий печени миног 98
3.4.3. Проницаемость митохондрий печени миног в неионизированнои изоосмотичной среде 100
3.4.4. Действие Са2+, Pi, лаурата и CsA на набухание митохондрий в неионизированнои среде 101
4. Обсуждение
4.1. Метаболизм глюкозы, липидов и свободных аминокислот в тканях миног и лягушек в разные сезоны года 104
4.2. Биоэнергетические особенности гепатоцитов пойкилотермных позвоночных животных 116
4.3. Роль АТФ/АДФ - и аспартат/глутаматного антипортеров в разобщении окислительного фосфорилирования. Вклад свободного окисления в клетках печени миног 120
4.4. Роль неспецифической проницаемости митохондрий в развитии деструктивных изменений в печени миног 122
4.5. Регуляция функционирования поры в митохондриях пойкилотермных животных 125
Выводы 129
Список литературы 131
