Введение
Глава 1. Достижения и перспективы фармакотерапии нарушений липидного обмена и атеросклероза (обзор литературы) 14
1.1. Гиполипидемические средства 14
1.2. Экспериментальные модели атеросклероза и дислипидемий 17
1.3. Гиполипидемические свойства средств растительного происхождения 23
1.4. Перспективы использования сесквитерпеновых лактонов как гиполипидемических препаратов 26
Глава 2. Материал и методы исследования 30
2.1. Характеристика объектов исследования 30
2.2. Модели, методы исследования и экспериментальные животные 35
2.3. Скрининг гиполипидемической активности (1-й этап исследования) 38
2.3.1. Модель острой экспериментальной гиперлипидемии у крыс, индуцированной этиловым спиртом 38
2.3.2. Модель острой экспериментальной гиперлипидемии у крыс, индуцированной детергентом WR 1339 40
2.3.3. Экспериментальная модель гиперлипидемии у крыс, индуцированной диетой, содержащей холестерол и жиры 42
2.3.4. Изучение гиполипидемического действия на клеточной культуре крысиной гепатомы при экспериментальной модели гиперлипидемии, индуцированной жировой эмульсией 45
2.3.5. Оценка экспрессии генов ключевых ферментов липидного обмена на клеточной культуре крысинной гепатомы 49
2.3.5.1. Оценка экспрессии мРНК генов метаболизма липидов 51
2.3.5.2. Синтез комплементарной ДНК 56
2.3.5.3. Полимеразная цепная реакция в реальном времени 56
2.4. Исследование механизмов гиполипидемической активности сесквитерпеновых лактонов (2-й этап исследования) 59
2.4.1. Оценка экспрессии мРНК генов метаболизва липидов в печени крыс 59
2.4.2. Изучение активности ГМГ-КоА-редуктазы и экскреци холестерола 62
2.5. Статистическая обработка данных 64
Глава 3. Скрининг гиполипидемической активности (1-й этап исследования) 66
3.1. Исследование эффектов лактонов при острой экспериментальной гиперлипидемии у крыс, индуцированной этиловым спиртом 66
3.2. Гиполипидемическое действие лактонов при острой экспериментальной гиперлипидемии у крыс, индуцированной детергентом WR 1339 79
3.3. Действие сесквитерпеновых лактонов при экспериментальной модели гиперлипидемии у крыс, индуцированной диетой, содержащей холестерол и жиры 91
3.4. Изучение гиполипидемического действия на клеточной культуре крысиной гепатомы (НТС) in vitro при экспериментальной модели гиперлипидемии, индуцированной жировой эмульсией 105
3.4.1. Жизнеспособность клеточной культуры гепатомы крыс под воздействием сесквитерпеновых лактонов и гемфиброзила 105
3.4.2. Содержание липидов в клеточной культуре гепатомы крыс 108
3.4.3. Содержание липидов в клеточной культуре гепатомы крыс на экспериментальной модели гиперлипидемии 114
3.5. Оценка экспрессии геновключевых ферментов липидного обмена в клеточной культуре гепатомы под влиянием сесквитерпеновых лактонов 121
3.5.1. Ген рецепторов к липопротеинам низкой плотности (Ldlr) 121
3.5.2. Ген 3-гидрокси-3-метилглутарил КоА-редуктазы (Hmgcr) 123
3.5.3. Ген ацил КоА-холестерол ацилтрансферазы (Soat1) 125
3.5.4. Ген холестерол 7-альфа-гидроксилазы (Cyp7a1) 126
3.5.5. Гены карнитин-пальмитоилтрансферазы 1и 2 (Cpt1a и Cpt2) 128
3.5.6. Ген ацетил-КоА карбоксилазы (Acaca) 131
Глава 4. Исследование механизмов гиполипидемической активности сесквитерпеновых лактонов (2-й этап исследования) 143
4.1. Влияние сесквитерпеновых лактонов на экспрессию генов ключевых ферментов липидного обмена в печени крыс на модели гиперлипидемии у экспериментальных животных, вызванной атерогенной диетой 143
4.1.1. Ген рецепторов к липопротеинам низкой плотности (Ldlr) 143
4.1.2. Ген 3-гидрокси-3-метилглутарил КоА-редуктазы (Hmgcr) 144
4.1.3. Ген ацилКоА холестерол ацилтрансферазы (Soat1) 146
4.1.4. Ген холестерол 7-альфа-гидроксилазы (Cyp7a1) 148
4.1.5. Гены карнитин-пальмитоилтрансферазы 1и 2 (Cpt1a и Cpt2) 150
4.2. Экскреция холестерола через желудочно-кишечный тракт под влиянием леукомизина 153
4.3. Влияние леукомизина на активность ГМГ-КоА-редуктазы в печени 155
Заключение 168
Список сокращений и условных обозначений 173
Список литературы 175
