Введение
ЧАСТЬ I Обзор литературы 11
ГЛАВА 1. Хантавирусы 12
1.1 Общие сведения 12
1.2 Морфология и молекулярная биология хантавирусов 13
1.3 Антигенные и генетические взаимоотношения 18
1.4 Специфическая лабораторная диагностика 20
1.5 Применение клеточных культур в хантавирусологии 24
ЧАСТЫ1 Собственные исследования 29
Глава 2. Материалы и методы исследований 29
2.1 Клеточные культуры 29
2.2 Вирусы 30
2.3 Иммунные сыворотки и моноклональные антитела 31
2.4 Непрямой метод иммунофлюоресценции (МФА) 31
2.5 Методы иммуноферментного анализа (ИФА) 32
2.6 Метод индикации фокусобразующихединиц (МФОЕ) 33
2.7 Реакция нейтрализации в культуре клеток (РН) 34
2.8 Изоляция хантавирусных штаммов 35
2.9 Индикация микоплазм в культуре клеток методом ПЦР 36
2.10 Санация клеточных культур ПТ-1 и 4647 от микоплазменной контаминации 36
2.11 ОТ-ПЦР 37
2.12 Методы электронной микроскопии 38
2.13 Статистические методы 40
ГЛАВА 3. Репликация патогенных хантавирусов в клеточных линиях различного происхождения 41
3.1 Сравнительная оценка эффективности методов индикации размножения 41
3.2 Адаптация хантавирусов к размножению в клеточных культурах различного происхождения 44
3.3 Динамика размножения хантавирусов в клетках наиболее пермиссивных клеточных культур 53
3.3.1 Определение оптимальной множественности заражения 54
3.3.2 Влияние различных условий на динамику накопления вируса Пуумала в КЖ 58
3.3.3 Анализ динамики размножения вируса Пуумала в течение длительного периода времени в культуре клеток VERO 62
3.3.4 Характеристика ФОЕ патогенных хантавирусов в культурах VERO и Vero Е6 64
ГЛАВА 4. Изоляция и идентификация штаммов хантавирусов 67
4.1 Изолирование хантавирусов в культуре клеток 67
4.2 Иммунологическая дифференциация штаммов хантавирусов (МФА, РН) 70
ГЛАВА 5. Морфологическая характеристика хантавирусов 74
Обсуждение 80
Заключение 90
Выводы 91
Список цитируемой литературы
