Введение
1. Обзор литературы 8
1.1 Гепатит В 8
1.2. Вакцины против гепатита В 13
1.3. Вакцины на основе химерного HBcAg 17
1.4. Способы доставки антигенов HBV 27
2. Материалы и методы 38
2.2 Выделение плазмидных ДНК 40
2.3 Трансформация бактериальных клеток 41
2.4 Конструирование рекомбиантных ДНК 41
2.5 Выделение рекомбинантных белков 42
2.6 Электрофорез в акрилами дном геле и иммуноблоттинг белков 43
2.7 Электронная микроскопия 43
2.8 Иммунизация лабораторных животных 44
2.9 Иммуноферментыый анализ 44
2.10 Трансфекция 45
2.11 ELISPOT 45
2.12 Математические методы исследований 46
3. Результаты и обсуждения 47
3.1. Конструирование химерных HBcAg 48
3.1.1. Выбор иммуиогенных фрагментов поверхностного белка HBV 48
3.1.2. Конструирование плазмид, экспрессирующих химерные белки НВс, несущие эпитопы preS 1 и preS2
3.1.3. Анализ физико-химических параметров встроек в HBcAg 56
3.2. Исследование иммуногенности химерных частиц HBcAg 65
3.3. Способы доставки HBcAg 72
3.3.1. Доставка HBcAg с помощью аттенуированного штамма сальмонеллы S. enteridlUs Е-23 72
3.3.2. Конструирование и исследование иммуиогенных свойств ДНК вакцины на основе HBcAg
Заключение 86
Выводы 89
