Введение
Глава 1. Обзор литературы 19
1.1 Вирус гриппа и его жизненный цикл 19
1.2 Строение и фузогенная активность гемагглютинина 21
1.3 Препараты для профилактики и терапии гриппа 23
1.4 Противогриппозные соединения – ингибиторы гемагглютинина 27
1.4.1. Ингибиторы связывания с рецептором 27
1.4.2. Ингибиторы фузогенной активности HA 35
1.5 Ингибиторы протонного насоса M2 61
1.5.1. BL-1743 и его аналоги 78
1.5.2. Каркасные гомологи адамантана и их производные 81
1.6 Биологическая активность камфоры и её производных 94
Глава 2. Материалы и методы 96
2.1. Химические соединения 96
2.2. Вирусы и клетки 96
2.3. Изучение противовирусной активности соединений 97
2.4. Титрование вирусов 97
2.5. Исследование токсичности соединений in vitrо 99
2.6. Оценка токсичности соединений in vivo 100
2.7. Оценка противовирусной активности соединений in vivo 100
2.8. Гистологические исследования 102
2.9. Изучение стадии вирусной репродукции – мишени действия соединений 103
2.10. Изучение воздействия соединений на гемагглютинин вируса гриппа 103
2.11. Компьютерное моделирование взаимодействия препаратов с рецептором 104
2.12. Получение устойчивых к камфецину вариантов вируса гриппа 104
2.13. Молекулярно-биологические методы 105
2.14. Электронно-микроскопические исследования 106
2.15. Статистическая обработка результатов 108
Глава 3. Противовирусная активность производных камфоры 109
3.1. Закономерности противовирусной активности производных камфоры по результатам первичного скрининга соединений in vitro 109
3.2. Изучение спектра противовирусной активности производных камфоры 116
3.3. Определение уровня и спектра противогриппозной активности камфецина в опытах на животных 122
3.4. Влияние камфецина на морфогенез экспериментальной летальной гриппозной инфекции у белых мышей 143
3.5. Оптимизация режима и способа применения камфецина для терапии экспериментальной гриппозной инфекции 147
3.6. Токсикологическая характеристика камфецина 157
3.7. Заключение. 158
Глава 4. Исследование механизма противовирусной активности производных камфоры . 160
4.1. Изучение стадии вирусного цикла – мишени действия производных камфоры 160
4.2. Активность производных камфоры в отношении гемагглютинина вируса гриппа 161
4.3. Влияние производных камфоры на ультраструктуру клеток в ходе морфогенеза гриппозной инфекции in vitro 163
4.4. Оценка сайта связывания производных камфоры с вирусным гемагглютинином 168
4.5. Заключение 172
Глава 5. Селекция и изучение вирусных штаммов, резистентных к камфецину 173
5.1. Селекция камфецин-резистентного варианта вируса in vitro 173
5.2. Исследование свойств камфецин-резистентного вируса гриппа 174
5.3. Идентификация мутаций, обусловливающих камфецин-резистентность 176
5.4. Заключение 181
Обсуждение полученных результатов и заключение 183
Выводы 207
Cписок литературы 210
Приложение. 234
