Введение
2 Обзор литературы 10
2.1 Актуальность проблемы 10
2.2 Общая характеристика семейства Пикорнавирусов
2.2.1 Эпидемиология энтеровирусной инфекции 13
2.2.2 Характеристика клинических симптомов при ЭВИ 15
2.2.3 Патогенез энтеровирусной инфекции
2.2.5 Строение и жизненный цикл вируса Коксаки В4 19
2.2.6 Строение поджелудочной железы 21
2.2.7 Патогенез Коксаки В4 инфекции в поджелудочной железе 22
2.3 Этиология инсулин-зависимого диабета 1 типа 22
2.3.1 Патогенез ИЗД 1 типа 27
2.3.2 Окислительный стресс при ИЗД 1 типа 29
2.3.3 Современные методы терапии ИЗД 1 типа
2.4 Взаимосвязь Коксаки В4 вирусной инфекции и ИЗД 1 типа 36
2.5 Химиотерапия энтеровирусных инфекций
2.5.1 Ингибиторы прикрепления, входа и раздевания 38
2.5.2 Препараты, направленные на подавление вирусной репликации 41
2.5.3 ЗСпротеазные ингибиторы 44
2.5.4 2Апротеазные ингибиторы 47
2.5.5 Ингибиторы сборки и выхода вириона 47
2.5.7 Дополнительная химиотерапия 47
2.6 Биологическая активность флавоноидов 49
2.6.3 Биологическая активность дигидрокверцетина 50
3 Материалы и методы 52
3.1 Исследуемые препараты 52
3.2. Вирусы и клетки 53
3.3. Подготовка вируса 53
3.4. Питательные среды 53
3.5. Исследование токсичности препаратов 53
3.6. Определение антиоксидантной активности препаратов 54
3.7. Титрование вируса 55
3.8. Определение противовирусной активности препаратов 55
3.9. Животные
3.10 Исследование противовирусной активности препаратов in vivo 56
3.11 Определение антиоксидантной активности препарата in vivo 56
3.12 Определение уровня интерферона in vivo 56
3.13 Приготовление гистологических срезов и проведение гистологической окраски 57
3.14 Изучение стадии вирусной репродукции - мишени действия дигидрокверцетина 58
3.15 Изучение вирулицидногодействия препаратов 59
3.16 Получение устойчивых к дигидрокверцетину штаммов вируса Коксаки В4 59
3.17 Электронная микроскопия 59
3.18 Статистическая обработка данных 60
4 Результаты 61
4.1 Оценка антиоксидантной активности препаратов 61
4.2 Моделирование коксакивирусной инфекции в культуре клеток 64
4.2.1 Оценка противовирусной активности соединений в опытах in vitro 65
4.2.1.1 Цитотоксичность веществ-антиоксидантов 65
4.2.1.2 Противовирусная активность соединений 67
4.3. Изучение стадии вирусной репродукции - мишени действия ДКВ 72
4.4 Вирулицидное действие ДКВ 74
4.5 Селекция и изучение вирусов, устойчивых к ДКВ 74
4.6 Разработка и характеристика модели коксакивирусного поражения ПЖу белых мышей
4.6.1 Сравнительная оценка эффективности внутрибрюшинного и внутримышечного способов эффективности заражения 78
4.6.2 Динамика репродукции вируса в ткани поджелудочной железы 79
4.7 Исследование активности природных антиоксидантов на модели коксакивирусной инфекции у белых мышей 80
4.7.1 Оценка противовирусной активности препаратов в опытах in vivo 81
4.7.2 Влияние природных антиоксидантов на морфогенез экспериментальной коксакивирусной инфекции у мышей 82
4.7.3 Антиоксидантная активность ткани поджелудочной железы при энтеровирусном панкреатите 85
4.7.4 Оценка уровня выработки интерферона в крови мышей, зараженных вирусом Коксаки В4 при терапии ДКВ 86
4.8 Влияние ДКВ на ультраструктурные особенности морфогенеза коксакивирусной инфекции в культуре клеток 87
Обсуждение 91
Список литературы 105
