Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1 Роль основных возбудителей гнойных бактериальных менингитов (ГБМ) в этиологической структуре инфекционных заболеваний 13
1.2 Характеристики основных возбудителей ГБМ 16
1.2.1 Neisseria meningitidis 16
1.2.2 Haemophilus infuenzae 17
1.2.3 Streptococcus pneumoniae 19
1.3 Лабораторная диагностика ГБМ 20
1.4 Питательные среды для выделения и культивирования основных возбудителей ГБМ 22
1.4.1 Питательные среды лабораторного приготовления 22
1.4.2 Полусинтетические и синтетические питательные среды 24
1.4.3 Селективные питательные среды 27
Глава 2. Материалы и методы исследования 30
2.1 Микроорганизмы 30
2.2 Питательные среды 31
2.3 Компоненты питательных сред 32
2.4 Приготовление питательных сред 34
2.5 Микробиологические методы исследования 34
2.5.1 Посев и инкубирование микроорганизмов 34
2.5.2 Определение биологических показателей качества питательных сред 35
2.5.3 Определение стерильности 36
2.5.4 Кондуктометрический метод исследования 36
2.5.5 Метод электронной микроскопии 37
2.5.6 Клинические испытания 38
2.5.7 Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам 39
2.6 Молекулярно-биологические методы 40
2.7 Физико-химические методы исследования питательных сред 41
2.7.1 Определение pH 41
2.7.2 Определение массовой доли влаги и сухого остатка 41
2.7.3 Определение содержания аминного азота 42
2.7.4 Определение содержания хлоридов 43
2.7.5 Определение прочности студня, температуры и продолжительности плавления студня 44
2.7.6 Определение срока годности 44
2.8 Прочие методы, использованные при проведении исследования 45
2.8.1 Получение дрожжевого автолизата 45
2.8.2 Лиофильное высушивание 46
2.8.3 Математическая обработка данных 46
Глава 3. Разработка питательных сред 47
3.1 Конструирование основы питательной среды для культивирования основных возбудителей ГБМ 47
3.1.1 Выбор белкового гидролизата 47
3.1.2 Обогащение питательной среды 50
3.2 Конструирование питательной среды для выделения и культивирования H. infuenzae 55
3.3 Конструирование питательных сред для выделения N. meningitidis, S. pneumoniae и H. infuenzae 62
3.4 Изучение биологических показателей качества разработанных питательных сред 69
3.4.1 Исследование культуральным методом 69
3.4.2 Электронно-микроскопическое исследование 73
3.4.3 Исследование методом ПЦР 75
Глава 4. Разработка технологии производства питательных сред 79
4.1 Разработка технологии серийного производства основ питательных сред 79
4.1.1 Разработка технологии серийного производства основы ГБМ-агара 79
4.1.2 Разработка технологии серийного производства основы Гемофилус агара 81
4.1.3 Разработка технологии серийного производства основы Шоколадного агара 83
4.2 Разработка технологии серийного производства ростовых и селективных добавок 86
4.3 Определение сроков годности разработанных питательных сред 90
4.4 Определение требований к биологическим показателям производственных серий питательных сред 92
Глава 5. Оценка качества производственных серий разработанных питательных сред 96
5.1 Сравнительная оценка биологических показателей качества разработанных питательных и известных сред для культивирования ГБМ 96
5.2 Изучение диагностической ценности разработанных питательных сред при исследовании клинических образцов 101
Заключение 108
Выводы 112
Список литературы 113
Публикации автора по теме диссертации 127
Список рисунков 130
Список таблиц 133
Приложение А. Фотографии, полученные в результате электронно-микроскопического исследования 134
Приложение Б. Регистрационные удостоверения разработанных питательных сред 136
