Введение
I. Обзор литературы 4
1.1. Метилируемые последовательности эукариотических ДНК 4
1.2. Структура и функции цитозин(С5)-ДНК-метилтрансфераз 9
1.2.1. Первичная структура цитозин(С5)-ДНК-метилтрансфераз 9
1.2.2. Эукариотические ДНК-метилазы 11
1.2.2.1. ДНК-метилазы растений 12
1.2.3. Регуляция экспрессии ДНК-метилазных генов 20
1.3. Функциональная роль метилирования ДНК растений 22
1.3.1. Влияние метилирования ДНК на структуру хроматина 22
1.3.2. Тотальное метилирование цитозина в ДНК растений и РНК-интерференция 25
1.3.3. Роль метилирования ДНК в развитии растений 30
1.3.4. Метилирование ДНК и геномный импринтинг 32
1.3.5. Влияние неблагоприятных условий окружающей среды на метилирование ДНК растений 35
II. Материалы и методы исследования 39
2.1. Материалы и оборудование 39
2.1.1. О борудование 39
2.1.2. Реактивы, среды и ферменты 39
2.1.3. Бактериальные штаммы и плазмиды 43
2.1.4. Растительный материал 43
2.2. Методы 45
III. Результаты и их обсуждение 55
3.1. Влияние интеграции гена ДНК-метилтрансферазы ZJCORII на фенотип и картину метилирования CpNpG-последовательностей генома трансгенных клеток высших эукариот 55
3.1.1. Получение рекомбинантных плазмид с модифицированным геном ДНК-метилтрансферазы ЕсоШІ для экспрессии в клетках высших эукариот 56
3.1.2. Получение трансгенных растений Nicotiana tabacum, содержащих модифицированный ген NLS-MiiCoRII 61
3.1.3. Анализ метилирования ДНК трансформированных клеток человека НК293, экспрессирующих модифицированный ген NLS-M^coRII-GFP 73
3.2. Исследование метилирования ДНК растений Mesembryanthemum crystallinum в стрессовых условиях 80
IV. Выводы 89
Список литературы 90
