Введение
Глава 1. Основные подходы к поиску и фармакологической коррекции состояний, сопровождающихся повышенным тромбогенным потенциалом крови (обзор литературы). 13
1.1.Социальная значимость процесса тромбогенеза 13
1.2. Механизмы активации тромбоцитарно-сосудистого звена гемостаза 14
1.3.Методы фармакологической коррекции процессов агрегации тромбоцитов20
1.4.Обоснование роли перекисного окисления липидов в тромбообразовании. 26
1.5.Бензимидазолы как перспективный класс для поиска новых лекарственных средств. 27
Глава 2. Материалы и методы исследований 30
2.1.Материалы исследований 30
2.2.Методы исследований 42
Метод исследования функциональной активности тромбоцитов in vitro 42
Метод исследования антиоксидантной активности. 44
Метод исследования функциональной активности тромбоцитов in vivo. 45
Метод проведения анализа зависимости между антиагрегантной активностью и химической структурой производных бензимидазола. 47
Методы исследования антитромботических свойств соединений. 47
Модель «время кровотечения» на мышах 53
Методы исследования механизма антиагрегантного действия 53
Исследование влияния соединений на баланс тромбоксана В2 и 6-кето простагландина (PGF1). 56
Измерение уровня внутриклеточного кальция в тромбоцитах кролика. 57
Изучение общетоксических свойств. 58
Исследование острой токсичности (LD50). 61
Статистическая обработка данных. 62
Глава 3. Поиск соединений с антиагрегантной активностью в ряду новых производных бензимидазола 63
3.1. Поиск соединений, ингибирующих агрегацию тромбоцитов in vitro . 64
3.2.Антиагрегантное действие соединений РУ-1263, РУ-1144 и РУ-1261 в опытах in vivo. 69
3.3.Острая токсичность соединения РУ-1144. 72
3.4.Зависимость антиагрегантной активности от химической структуры соединений. 74
3.5.Заключение 87
Глава 4. Исследования влияния соединения РУ-1144 на тромбообразование у интактных животных и животных с экспериментальной патологией 88
4.1.Изучение антитромботической активности соединения РУ-1144 на модели артериального тромбоза, индуцированного аппликацией раствора хлорида железа (III) на сонную артерию крыс 89
4.2.Исследование антитромботического действия соединения РУ-1144 на модели артериального тромбоза, индуцированного электрическим током 90
4.3.Изучение антитромботического действия соединения РУ-1144 на модели Global Thrombosis Test (по Горогу) 92
4.4. Исследование влияния соединения РУ-1144 на выживаемость мышей на модели генерализованного адреналин-коллагенового тромбоза 93
4.5. Определение антитромботического действия соединения РУ-1144 на модели артериального тромбоза, индуцированного аппликацией раствора хлорида железа (III) на сонную артерию крыс с экспериментальным инфарктом миокарда 99
4.6.Исследование антитромботической активности соединения РУ-1144 на модели венозного тромбоза, индуцированного полной перевязкой нижней полой вены крыс .100
4.7. Изучение влияния соединения РУ-1144 на время кровотечения 102
4.8. Заключение 102
Глава 5. Изучение механизма антиагрегантного действия нового производного бензимидазола соединения РУ-1144 106
5.1. Влияние соединения РУ-1144 на рецепторные пути активации тромбоцитов 107
5.1.1. Изучение влияния соединения РУ-1144 на агрегацию тромбоцитов, вызванную АДФ. 107
5.1.2. Антиагрегантная активность соединения РУ-1144 и препарата сравнения ацетилсалициловой кислоты на модели адреналин-индуцированной агрегации тромбоцитов плазмы кроликов. 108
5.1.3. Исследование антиагрегантной активности РУ-1144 и препарата сравнения ацетилсалициловой кислоты на модели агрегации тромбоцитов плазмы кроликов, индуцированной арахидоновой кислотой. 109
5.1.4. Антиагрегантная активность соединения РУ-1144 на модели коллаген индуцированной агрегации тромбоцитов плазмы кроликов. 110
5.1.5. Исследование антиагрегантной активности соединения РУ-1144 на модели агрегации тромбоцитов, индуцированной фактором активации тромбоцитов (ФАТ). 111
5.1.6. Антиагрегантная активность соединения РУ-1144 на модели агрегации тромбоцитов, индуцированной ристоцетином 112
5.1.7. Исследование антиагрегантной активности соединения РУ-1144 на модели агрегации тромбоцитов, индуцированной тромбином 113
5.1.8. Антиагрегантная активность соединения РУ-1144 на модели агрегации тромбоцитов, вызванную агонистом PAR1 (протеазо-активированные рецепторы тромбоцитов 114
5.1.9. Исследование антиагрегантной активности соединения РУ-1144 на модели агрегации тромбоцитов, индуцированной агонистом тромбоксановых рецепторов U 46619. 114
5.1.10. Влияние соединения РУ-1144 на пуриновые P2Y1 и P2Y12 рецепторы тромбоцитов 115
5.2. Влияние соединения РУ-1144 на тромбоксан-простациклиновый баланс в тромбоцитах крыс 117
5.2.1. Исследование влияния соединения РУ-1144 на продукцию тромбоксана В2 в тромбоцитах интактных крыс. 117
5.2.2. Влияние соединения РУ-1144 на продукцию 6-кето-простагландина F1 119
5.3. Влияние соединения РУ-1144 на уровень внутриклеточного кальция в тромбоцитах. 120
5.3.1. Действие соединения РУ-1144 на общий уровень кальция в тромбоцитах 120
5.4. Заключение. 123
Глава 6. Общетоксические свойства соединения РУ-1144 128
6.1. Исследование влияния соединения РУ-1144 на поведенческий статус мышей (тест «открытое поле»). 128
6.2. Влияние соединения РУ-1144 на эмоциональный статус, рефлексы и нервно-мышечную возбудимость 133
6.3. Влияние соединения РУ-1144 на реактивность, двигательную и мышечную координацию животных 135
6.4. Действие соединения РУ-1144 на вегетативную нервную систему . 138
6.5. Заключение 141
Глава 7. Обсуждение результатов 142
Список условных сокращений 167
Список литературы 169
