Введение
Литературный обзор 7
1. Направленная эволюция ферментов 7
1.1. Создание генетического разнообразия 8
1.2. Высоко-эффективные методы отбора библиотек 10
2. Рациональный дизайн, как средство улучшения каталитической эффективности 17
2.1. Рациональный дизайн на основе экспериментальных данных 17
2.2. Рациональный дизайн на основе компьютерных методов 20
3. Получение антител, нейтрализующих ФОТ 42
Материалы и методы 47
1. Расчетные методы 47
2. Химические реактивы и сопутствующие материалы 49
3. Растворы 51
4. Работа с нуклеиновыми кислотами 51
5. Методы работы с бактериями E.coli 55
6. Методы работы с дрожжами Pichia Pastohs 57
7. Работа с белками 60
Результаты и обсуждения 67
1. Детализация механизма реакции антитела А17 с параоксоном 67
2. Создание виртуальной библиотеки для in siiico скрининга 74
3. Сайт-направленный мутагенез антитела А17. Функциональный анализ мутантов 82
4. Структурный анализ мутанта L-S35R 96
Заключение 103
Выводы 104
Список литературы 105
