Введение
Глава 1 Обзор литературы 13
1.1. Краснуха. 13
1.2. Эпидемиология краснухи. 14
1.3. Краснуха у беременных и СВК. 16
1.4. Серологическая диагностика краснухи. 17
1.5. Общая характеристика вируса краснухи. 18
1.6. Структурные белки вируса краснухи. 19
1.7. Организация генома вируса краснухи . 20
1.8. Репликация генома вируса краснухи. 21
1.9. Особенности гуморального иммунного ответа при краснухе. 21
1.10. Развитие серологических методов в диагностике краснухи 22
1.11. Лабораторная диагностика краснухи в довакцинальный период. 26
1.12. Лабораторная диагностика краснухи в период элиминации. 27
1.13. Иммуноферментный анализ в диагностике инфекции краснухи. 30
1.14. Подтверждающие методы диагностики краснушной инфекции. 32
1.15. Автоматизированные диагностические комплексы. 35
1.16. Диагностика краснухи во время беременности. 36
1.17. Вакцинопрофилактика краснухи. 36
1.18. Эпидемиология СВК. 38
1.19. Патогенез СВК. 39
Заключение 41
Глава 2 Материалы и методы 42
2.1. Материалы и реагенты. 42
2.1.1. Клинический материал 43
2.1.2. Стандартные образцы. 43
2.1.3. Основные реагенты. 43
2.1.4. Прочие реагенты 45
2.1.5. Диагностические тест-системы . 45
2.2. Буферные растворы. 45
2.3. Оборудование. 47
2.4. Методы исследования. 48
2.4.1. Биохимические методы. 48
2.4.2. Серологические методы. 49
2.4.3. Статистические методы и программное обеспечение. 50
Глава 3. Собственные исследования 51
3.1. Разработка иммуноферментной тест-системы для количественного выявления IgG антител к вирусу краснухи. 52
3.1.1. Получение иммуносорбента антигена вируса краснухи. 52
3.1.2. Оптимизация основных условий проведения иммуноферментного анализа. 58
3.1.3. Сравнительная оценка антивидовых конъюгатов. 59
3.1.4. Определение диапазона линейной зависимости оптической плотности от концентрации IgG антител . 61
3.1.5. Определение оптимального разведения образцов. 62
3.1.6. Воспроизводимость результатов при количественной оценке уровня IgG-антител к вирусу краснухи. 63
3.1.7. Оценка диагностической чувствительности ИФТС для определения IgG к вирусу краснухи. 64
3.1.8. Оценка аналитической чувствительности при определении IgG
к вирусу краснухи. 65
3.1.9. Оценка распределения уровня IgG к вирусу краснухи в исследуемой популяции. 67
3.1.10. Оценка диагностической специфичности тест-системы при выявлении IgG к вирусу краснухи. 68
3.2. Разработка иммуноферментной тест-системы для выявления IgM
антител к вирусу краснухи на основе метода «захвата». 69
3.2.1. Получение пероксидазного конъюгата на основе краснушного антигена и оценка его специфической активности. 70
3.2.2. Получение иммуносорбента для выявления IgM антител человека методом «захвата». 72
3.2.3. Определение порогового уровня тест-системы для IgM к вирусу краснухи. 73
3.2.4. Оценка специфичности тест-системы для выявления IgM к вирусу краснухи. 74
3.2.5. Определение чувствительности тест-системы для выявления IgM к вирусу краснухи. 75
3.2.6. Исследование стабильности аналитических свойств тест-систем в процессе хранения. 78
3.3. Исследования популяционного иммунитета к вирусу краснухи различных групп населения (беременные, дети, доноры).
Особенности применения ИФТС в диагностике краснухи. 79
3.3.1. Сравнительная количественная оценка уровня IgG к вирусу краснухи в сыворотке крови с использованием иммуноферментных тест-систем отечественных и зарубежных производителей . 80
3.3.2. Сравнительная оценка диагностической значимости выявления IgM к вирусу краснухи с помощью иммуноферментных тест-систем в условиях спорадической заболеваемости. 81
3.3.3. Исследование напряженности коллективного иммунитета к вирусу краснухи на территории Московской области. 82
3.3.4. Исследование серопревалентности к вирусу краснухи среди пациентов детской клинической больницы. 84
3.3.5. Сравнительная оценка уровня антител к вирусу краснухи в сыворотках крови с помощью методов ИФА и РТГА. 86
3.4. Обсуждение результатов 90
Выводы 99
Список литературы
